PKA ELISA 06-14-11

2011-06-13 Elisa result: <tab border="1"> blocking buffer 667 668 669 670 671 672 673 674 675 929 930 931 932 933 938 939 943 31 32 33 34 35 39 Control PBST/2%BSA 0.213 0.48 0.106 0.565 0.1265 0.479 0.6135 0.1175 0.4105 0.104 0.0905 0.3275 0.344 0.0875 0.193 0.4845 0.2135 0.2325 0.2 0.13 0.155 0.1055 0.1975 0.06 PBST/5%BSA/3% goat serum 0.314 0.215 0.0697 0.2643 0.076 0.1877 0.242 0.0877 0.2013 0.0663 0.063 0.217 0.2327 0.0663 0.109 0.2957 0.136 0.1703 0.1057 0.108 0.1017 0.0807 0.129 0.0603 Pierce superblocking buffer 0.223 0.458 0.1297 0.5277 0.1427 0.6597 0.9483 0.1573 0.5117 0.1187 0.1057 0.414 0.4057 0.1103 0.2127 0.5347 0.211 0.2387 0.1827 0.1683 0.1717 0.116 0.2163 0.0653

</tab> see the lab note 002924 page. serum 1:1000 dilution in pbst/2%BSA/1%mouse serum; secondary Ab 1:10,000 dilution.

</tab> 2011-06-14 Elisa result:

Plate 1 <tab border="1"> 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 0.00 0.057 0.06 0.059 0.07 0.071 0.07 0.086 0.089 0.086 0.053 0.056 0.062 0.063 0.063 0.084 0.089 0.086 0.289 0.298 0.308 0.324 0.325 0.315 0.076 0.076 0.072 0.085 0.084 0.084 0.081 0.08 0.082 0.07 0.069 0.071 0.099 0.101 0.101 0.075 0.076 0.075 0.091 0.09 0.094 0.079 0.078 0.076 0.045 0.043 0.043 0.078 0.076 0.078 0.064 0.065 0.065 0.089 0.089 0.088 0.142 0.149 0.062 0.062 0.154 0.149 0.057 0.056 0.054 0.053 0.106 0.106 0.087 0.086 0.056 0.06 0.089 0.087 0.118 0.111 0.057 0.054 0.138 0.147 0.061 0.058 0.127 0.124 0.08 0.08 0.145 0.138 0.157 0.045 0.049 0.044 </tab> Plate 2

<tab border="1">

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 0.058 0.058 0.06 0.068 0.074 0.072 0.087 0.087 0.087 0.056 0.059 0.058 0.059 0.06 0.061 0.084 0.091 0.082 0.293 0.31 0.318 0.332 0.32 0.325 0.071 0.071 0.072 0.092 0.096 0.091 0.08 0.082 0.08 0.071 0.071 0.071 0.096 0.101 0.101 0.075 0.074 0.074 0.093 0.09 0.091 0.078 0.084 0.078 0.069 0.071 0.07 0.077 0.08 0.083 0.065 0.065 0.064 0.09 0.082 0.089 0.144 0.152 0.062 0.061 0.172 0.16 0.058 0.058 0.055 0.054 0.111 0.114 0.086 0.087 0.054 0.057 0.085 0.089 0.112 0.11 0.057 0.054 0.144 0.147 0.063 0.063 0.136 0.125 0.075 0.075 0.153 0.149 0.148 0.045 0.045 0.044 </tab>

</tab> see the lab note 002927 page. Because the subtrate is not good, the result is not necessary to use.

--Hylei 16:59, 14 June 2011 (EST) 2011-6-16 plate 1 data: <tab border="1"> Sample Values Average 673 0.581 0.606 0.541 0.576 674 0.103 0.107 0.108 0.106 675 0.478 0.423 0.436 0.446 929 0.095 0.101 0.102 0.099 930 0.092 0.09 0.087 0.09 931 0.277 0.287 0.287 0.284 932 0.248 0.254 0.254 0.252 933 0.078 0.078 0.08 0.079 667 0.207 0.198 0.199 0.201 668 0.274 0.303 0.31 0.296 669 0.091 0.092 0.089 0.091 670 0.502 0.511 0.525 0.513 671 0.095 0.097 0.095 0.096 672 0.27 0.279 0.303 0.284 938 0.185 0.189 0.187 0.187 939 0.516 0.515 0.508 0.513 40 0.107 0.107 0.106 0.107 132 0.126 0.13 0.142 0.133 133 0.167 0.165 0.153 0.162 135 0.091 0.104 0.084 0.093 136 0.113 0.112 0.113 146 0.136 0.139 0.138 941 0.719 0.713 0.716 942 0.62 0.615 0.618 940 0.119 0.119 0.119 937 0.161 0.169 0.165 934 0.221 0.217 0.219 936 0.202 0.203 0.203 935 0.171 0.177 0.174 943 0.175 0.179 0.177 31 0.162 0.168 0.165 32 0.182 0.174 0.178 33 0.118 0.115 0.117 34 0.13 0.124 0.127 35 0.096 0.095 0.096 39 0.146 0.146 0.15 0.147 Control 0.05 0.051 0.05 0.05 </tab>

2011-6-16 plate 2 data: <tab border="1"> Sample Values Averages 673 0.456 0.468 0.445 0.4563 674 0.093 0.093 0.093 0.093 675 0.378 0.376 0.392 0.382 929 0.093 0.095 0.096 0.0947 930 0.087 0.086 0.087 0.0867 931 0.254 0.27 0.264 0.263 932 0.228 0.229 0.237 0.231 933 0.073 0.073 0.075 0.0737 667 0.189 0.186 0.187 0.1873 668 0.244 0.241 0.247 0.244 669 0.085 0.087 0.084 0.0853 670 0.45 0.434 0.467 0.4503 671 0.083 0.09 0.087 0.0867 672 0.236 0.233 0.226 0.2317 938 0.174 0.17 0.175 0.173 939 0.459 0.461 0.465 0.4617 40 0.088 0.09 0.091 0.0897 132 0.115 0.115 0.121 0.117 133 0.127 0.121 0.122 0.1233 135 0.076 0.074 0.081 0.077 136 0.094 0.095 0.0945 146 0.106 0.107 0.1065 941 0.5 0.522 0.511 942 0.497 0.56 0.5285 940 0.107 0.148 0.1275 937 0.124 0.125 0.1245 934 0.164 0.157 0.1605 936 0.168 0.174 0.171 935 0.12 0.129 0.1245 943 0.149 0.158 0.1535 31 0.156 0.145 0.1505 32 0.137 0.135 0.136 33 0.109 0.193 0.151 34 0.122 0.116 0.119 35 0.089 0.089 0.089 39 0.121 0.115 0.122 0.1193 Control 0.047 0.049 0.048 0.048 </tab> see the lab note 002930 page. 2ug/ml pka diluted in 0.2M sodium carbonate/bicarbonate (PH 9.4) coating 2 plates 4 degree O/N; pierce superblocking buffer for 2 plates; serum 1:1000 dilution in pbst/2%BSA/1%mouse serum; secondary Ab 1:10,000 dilution in pbst/2%BSA/1%mouse serum; 100 ul substrate develop 30min then using the stop solution to stop.

--Hylei 16:59, 16June 2011 (EST)