PKA ELISA 6-20-11
<tab border="1">
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 0.468 0.451 0.368 0.361 0.216 0.219 0.137 0.135 0.129 0.127 0.134 0.103 0.219 0.213 0.281 0.288 0.178 0.181 0.114 0.119 0.123 0.122 0.099 0.1 0.437 0.419 0.373 0.399 0.227 0.231 0.136 0.141 0.134 0.138 0.101 0.101 0.275 0.281 0.322 0.333 0.195 0.194 0.113 0.118 0.138 0.125 0.101 0.097 0.279 0.266 0.333 0.288 0.258 0.264 0.126 0.14 0.126 0.13 0.103 0.093 0.302 0.296 0.256 0.248 0.178 0.177 0.147 0.155 0.17 0.166 0.102 0.101 0.191 0.205 0.211 0.213 0.148 0.157 0.136 0.128 0.146 0.145 0.087 0.091 0.228 0.23 0.237 0.237 0.206 0.216 0.142 0.138 0.228 0.15 0.101 0.098
</tab>
Line 1,2: 20ug/ml pka in 0.1M sodium bicarbonate; line 1, pierce blocking buffer; line 2, pbs/2%bsa blocking buffer;
Line 3,4,5, 10ug/ml pka; line 3, pierce blocking buffer; line 4, pbs/2%bsa blocking buffer; line 5, blocking buffer with glycerol. line 6,7,8 2ug/ml pka; line 6, pierce blocking buffer; line 7, pbs/2%bsa blocking buffer; line 8, blocking buffer with glycerol.
1,2 673; 3,4, 675; 5,6, 670; 7,8, 40; 9,10, 135; 11, 12 control. lab note 2933.
10ug/ml plate-06/21/2011
<tab border="1">
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 0.467 0.488 0.647 0.43 0.469 0.448 0.833 0.872 0.851 0.905 0.273 0.194 0.26 0.197 0.141 0.151 0.127 0.139 0.165 0.209 0.117 0.136 0.108 0.112 0.125 0.144 0.153 0.173 0.148 0.192 0.203 0.225 0.29 0.305 0.097 0.069 0.742 0.746 0.542 0.572 0.459 0.497 1.34 1.308 1.449 1.466 0.311 0.214 0.493 0.296 0.167 0.157 0.142 0.131 0.241 0.232 0.186 0.182 0.243 0.231 0.192 0.166 0.198 0.246 0.182 0.181 0.254 0.248 0.259 0.266 0.093 0.081 1.832 1.703 2.539 2.722 1.111 1.512 1.058 1.005 1.839 0.98 0.439 0.564 2.567 2.409 2.711 3.011 1.441 1.819 0.994 0.954 1.806 1.79 0.395 0.483
</tab>
2ug/ml plate-06/21/2011
<tab border="1">
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 0.303 0.29 0.572 0.468 0.383 0.373 0.857 0.901 0.795 0.827 0.227 0.215 0.198 0.242 0.131 0.124 0.105 0.112 0.209 0.218 0.122 0.125 0.109 0.114 0.127 0.151 0.13 0.124 0.14 0.132 0.2 0.262 0.186 0.214 0.095 0.1 0.547 0.486 0.525 0.569 0.382 0.392 1.163 1.213 1.374 1.457 0.245 0.282 0.298 0.299 0.163 0.173 0.134 0.191 0.228 0.24 0.21 0.181 0.197 0.195 0.172 0.157 0.139 0.145 0.199 0.178 0.246 0.226 0.242 0.376 0.074 0.075 1.309 1.595 2.106 1.832 0.907 1.215 0.943 1.11 1.098 1.128 0.521 0.553 1.89 1.951 2.564 2.762 1.538 1.91 1.18 1.205 1.764 1.593 0.536 0.564
</tab>
For the 10ug/ml and 2ug/ml plates, duplicate the sample, from a1 to c12, the template is: 670, 672, 939, 941, 942, 940, 935, 929, 930, 933, 671, 35, 135, 40, 136, 943, 936, control; 1:1000 dilution; for the d1 to f12, template order is same, 1:500 dilution; g1, g2 is the test for the new secondary ab, 1:5000 dilution, 200ng/ml, seems too strong, next time needs to more dilution.
Conclusion: 2ug/ml coating plates; compare with 06/16/11 data, for the 1:1000 dilution, 940, 935, 943, 936 previous data read is between 0.15 to 0.2, not sure positive, now all above 0.2, can consider positive; for the 929, 930, 933, 671 previous can consider negative, still below 0.2, can consider negative; for the 35, 135, 40, 136, all below 0.2.
next time condition is: 2ug/ml coating plates, serum 1:500 dilution, reader above 0.2 can think positive.